Diabetologia：激活但功能受损的知觉Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次浮现肝细胞自身免疫球蛋白到浮现1型号哮喘临床研究者疼痛的实质性率在儿童以前就有良好的所述，多个肝细胞自身免疫球蛋白HIV的儿童里面有70%在血清转换后10年中患上哮喘，而随访15年的儿童这一比重减寡到84%。相相比较之下，占临床研究者1型号哮喘一半以上的型号1型号哮喘的肺癌机能还无法获取充分的研究者。

越来越多的人开始用作有系统会系统会来定义1型号哮喘的实质性：母本体在浮现多种肝细胞自身免疫球蛋白时进入第1下一阶段，浮现高血压却是其时进入第2下一阶段，浮现疼痛时进入第3下一阶段。一些多发肝细胞自身免疫球蛋白HIV的母本体，在1期和2期，实质性较更慢，并转型为肺癌的1型号哮喘。我们在此之后所述了一四组在首次样品到多种肝细胞自身免疫球蛋白比对后至寡10年无哮喘的却是更慢实质性者，这四组患儿人数寡，但基本特征非常明确。随后，我们见到肝细胞自身上皮细胞特异性CD8+T细胞会质子化在实质性却是快的患儿里面理论上不假定，但在同类型肺癌和长期假定的哮喘患儿里面很易于样品到。这可能表明，与实质性患儿相相比较，这些患儿自身免疫质子化的调节提高。

早期研究者表明，尽管调节性T细胞会(Treg)数量正常，但哮喘患儿假定一些机能缺陷，其里面包括对IL-2的质子化并能减低。此外，哮喘患儿里面的不稳定性CD4+T细胞会可能对调节更是具抵抗性，本体现为不稳定性T细胞会的消除提高，共存显现出的Treg和本体外显现出的正向Treg，以及上皮细胞经历的CD4+T细胞会里面IL-2质子化提高。本研究者的目的是所述了CD4+调节性T细胞会(Treg)在群集却是却是快实质性者里面的基本特征，他们的岁数为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究者是一项以青年人基础上的纵向研究者，在21岁表列确诊的患儿亲属里面本体检1型号哮喘的危险主因。我们在此之后所述了长期却是快实质性者的基本特征，他们保持多重肝细胞自身免疫球蛋白HIV超过10年，但无法浮现哮喘的临床研究者疼痛，更慢性或非同步进行性自身免疫。随后，10名继续保持无哮喘并愿意发放大量血液比对的却是快实质性者扩展到T和B细胞会机能分析。在现有的研究者里面，8名更慢实质性者(SP四组)，里面位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁二者之间的肝细胞自身免疫球蛋白HIV。所有的四组织者都位处1型号哮喘实质性的1期，尽管一些人随后一落千丈了肝细胞自身免疫球蛋白对某些上皮细胞的HIV质子化，然而，一名患儿早就位处2期至寡6年，但无法浮现临床研究者疼痛，一名患儿被病症为哮喘，该受试者72岁，在采集实验比对时，其HbA1c升温到53 mmol/mol(7%)，在分析里面对该小分子同步进行了除此以外评核。转化外周血单个核细胞会(PBMCs)，采用多参数流式细胞会术和T细胞会消除实验评核小分子里面Treg的频率、变异号和机能。用作FlowSOM和CITRUS(聚类认定、举例来说和回归)同步进行无都由聚类分析，评核Treg变异号。

结果：与肥胖症小分子相相比较，来自更慢实质性本体的潜意识CD4+T细胞会的都由聚类说明了，作用于的潜意识CD4+ Treg频率减寡，与糖皮质激素正向的TNFR就其蛋白(GITR)传达减寡有关。一名HbA1c升温的患儿与实质性却是快者和反之亦然的相符合四组相相比较，Treg谱有所相同。机能新见到，与肥胖症小分子相相比较，来自却是快实质性本体的Treg介导的CD4+不稳定性T细胞会消除明显受损。本体现为对不稳定性CD4+T细胞会CD25和CD134传达的消除减寡。

上图1 深入的变异号分析说明了，CD4+Treg流感病毒号在更慢实质性配置文件里面减寡。由FlowSOM生成的Treg会议室，聚集地在来自所有小分子的来生CD4+CD45RA -细胞会上。根据标示物传达认定出10个元簇:潜意识T细胞会_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T细胞会;HLA-DR + GITR +潜意识T细胞会;内核Treg_1;内核Treg_2;内核Treg_3;和内核Treg_4。(a)用作9个相同Treg标示生成的10个元簇的MST。每个路由代表一个空降兵(100个空降兵)，相当大的元空降兵(10个元空降兵)在路由四组周围上色。每个路由里面的煎饼上图指出单个标示的传达级别。(b)每个元聚类的热上图，以说明了整本体而言标示传达。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)生成上图，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相比较丰度为每个metacluster箱里面央线上图(丰度> 0.05%)具本体为HD和SP四组:内核Treg_2 (e),内核Treg_3 (f),内核Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T细胞会(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T细胞会(l)。蓝色圆圈代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对记号秩检验。此键适用于上图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

上图2 用作CITRUS的预测模型号猜测，Treg频率的减寡是实质性却是快的标志。AO门控(a - f)和玉米分析(g-k)相比较SP四组织者和反之亦然的HD四组织者在CD4+CD45RA−T细胞会上的差异。(a)性状CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群本体的代表性上图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR传达同步进行转化，建模FlowSOM群本体。(b) HD(黑点)和SP(白斑)四组以及小分子SP 606(蓝色)里面CD25+ cd127的频率综合上图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的箱里面央线上图;(c) HLA-DRloGITR−(内核Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(内核Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(内核Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+内核T cell)。(g - i)棉花簇螺旋形由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3传达风速着色，箭头突出的簇被识别为SP和HD配置文件二者之间的相同。(j)箱里面央线上图说明了了在SP(白斑)和HD(灰点)四组里面，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相比较丰度(比重)。(k)直方上图说明了每个簇的变异号(粉红色)和Treg标示相比较传达与取材传达(蓝色);上列，内核Treg_3;上头一行，内核Treg_4。取材与所有其他簇里面标示的传达有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对记号秩检验

上图3 与肥胖症献血者相相比较，实质性却是快者潜意识treg的GITR减寡。每个潜意识CD4+T细胞会元簇(潜意识T细胞会_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T细胞会;HLA-DR + GITR +潜意识T细胞会;内核Treg_2;内核Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个传达标示的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)配置文件的传达热上图(sp606不包括在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇里面所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(蓝色)的FlowSOM GITR传达结合，说明了直方上图(c)和综合上图(d)。Wilcoxon配对记号秩和检验，p< 0.07(蓝色)所有小分子包括，p< 0.05(蓝色)小分子SP 606和反之亦然的HD不包括在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR传达，从AO门控，从所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(蓝色)结合，说明了直方上图(e)和综合上图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对记号秩检验

上图4 来自却是快实质性的CD4+ treg细胞会压制不稳定性CD4+T细胞会的并能减低。SP四组用蓝色的里面央线和圆圈指出，HD四组用黑色的里面央线和圆圈指出，蓝色的里面央线/圆圈指出小分子sp606。用作CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会同步进行分选。CD4+CD25−(此番者)被标示为CFSE, Treg按判读的比重校准。用抗CD3 /28微珠正向细胞会，培植3翌日同步进行流式细胞会术样品。(a-d)与CD4+此番者相比较应的treg培植(自本体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培植。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE消除总和(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的消除总和。用作HIV相符合(作用于的叛离细胞会包含treg)量化消除总和。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

上图5 不稳定性CD4+T细胞会对却是快实质性的T细胞会正向的消除更是引人注目。SP四组用蓝色的里面央线和圆圈指出，HD四组用黑色的里面央线和圆圈指出，蓝色的里面央线/圆圈指出小分子sp606。用作CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会同步进行分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标示，treg按判读的比重校准。用抗CD3 /28微珠正向细胞会，培植3翌日同步进行流式细胞会术(CD25反染)和细胞会因子分析。HD Treg与HD、SP或sp606此番者共同培植。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE消除百份(b)。(c,d) CD25消除百份(c)和CD134消除百份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培植里面的传达。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

论据：我们得出的论据是，来自却是快实质性子的正向潜意识CD4+Treg在GITR传达里面获取了扩充和比较丰富，强调了进一步研究者Treg在1型号哮喘风险母本体里面的举例来说的前提。

译者应是：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28